淀粉總量檢測(cè)提取過(guò)程測(cè)定操作
淀粉是植物中糖的主要儲(chǔ)存形式,其含量測(cè)定對(duì)于評(píng)價(jià)食品營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和調(diào)查植物體內(nèi)糖代謝都有重要意義。利用80%乙醇可以把樣品中可溶性糖與淀粉分開,進(jìn)一步采用酸水解法分解淀粉為葡萄糖,采用蒽酮比色法測(cè)定葡萄糖含量,即可計(jì)算淀粉含量。
可見分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、玻璃比色皿、研缽、冰、濃硫酸和蒸餾水。
淀粉總量檢測(cè)操作步驟:
一、淀粉提?。?/div>
1、稱取0.1g-0.2g樣品(建議稱取約0.1g樣本)于研缽中研碎,加入1mL試劑一,充分勻漿后轉(zhuǎn)移到EP管中,80℃水浴提取30min,3000g,常溫離心5min,棄上清,留沉淀。
2、沉淀中加入0.5mL蒸餾水,放入沸水浴中糊化15min(蓋緊,以防止水分散失)。
3、冷卻后,加入0.35mL試劑二,常溫提取15min,振蕩3-5次。
4、加入0.85mL雙蒸水,混勻,3000g,常溫離心10min,取上清液待測(cè)。
二、淀粉總量檢測(cè)測(cè)定操作:
1.分管光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至620nm,蒸餾水調(diào)零。
2.調(diào)節(jié)水浴鍋至95度。
3.工作液的配制:臨用前在試劑三中加入7.5mL蒸餾水后,緩慢加入42.5mL濃硫酸,不斷攪拌,充分溶解,待用。用不完的試劑4℃保存一周。
4.樣本測(cè)定:取0.2mL樣本和1mL工作液至EP管中,95度水浴10min(蓋緊,放置水分散失),自然冷卻至室溫,在620nm波長(zhǎng)下記錄測(cè)定吸光值A(chǔ)。