淀粉總量檢測(cè)淀粉可以看作是葡萄糖的高聚體。淀粉除食用外,工業(yè)上用于制糊精、麥芽糖、葡萄糖、酒精等,也用于調(diào)制印花漿、紡織品的上漿、紙張的上膠、藥物片劑的壓制等??捎捎衩?、甘薯、野生橡子和葛根等含淀粉的物質(zhì)中提取而得。
淀粉是谷物碳水化合物的主要成分也是人和動(dòng)物所需能量的重要來源。淀粉由于來源、組成及結(jié)構(gòu)不同其在動(dòng)物和人體內(nèi)消化的速度和部位存在差異,如快速消化淀粉在小腸的前段即迅速消化而抗性淀粉在小腸內(nèi)幾乎不降解,主要在大腸內(nèi)依靠微生物發(fā)酵產(chǎn)生揮發(fā)性,脂肪酸。
淀粉總量檢測(cè)用到的方法
1.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作
加入蒽酮試劑時(shí),好將各管放在冷水中,并沿管壁緩緩加入,待全部加完后,再混勻。將以上標(biāo)準(zhǔn)管和樣品管同時(shí)在100℃水浴中加熱10min,取出自來水冷卻,以空白作參比,在620nm波長(zhǎng)下測(cè)其光密度,以光密度為縱坐標(biāo),以糖含量為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并求出標(biāo)準(zhǔn)線性方程。
2.可溶性糖的提取
稱取1g樣品,加5ml80%乙醇,研磨成勻漿,80℃水浴中浸提10min,冷卻,離心5min,重復(fù)浸提一次,離心5min合并以上離心后的上清液于25ml溶量瓶,用80%乙醇定容至刻度,沉淀備用測(cè)定淀粉。
3.顯色測(cè)定
吸取樣品提取液0.1ml,加1.9ml蒸餾水,再沿管壁緩緩加5ml硫酸-蒽酮試劑,待全部加完后混勻,在100℃水浴中加熱10min,在100℃水浴中加熱10min,以不加樣液管為對(duì)照,在620nm波長(zhǎng)下測(cè)其光密度。
4.計(jì)算
可溶性糖含量(%)={[查標(biāo)準(zhǔn)曲線(μg)×(樣品液總體積/顯色用樣液體積)×稀釋倍數(shù)]/樣品(g)}×100
5.還原糖含量測(cè)定:取0.5ml稀釋液(1ml提取液稀釋至10ml),加入1.5ml蒸餾水,1.5ml3,5-二硝基水楊酸,混勻,沸水浴5min,冷水冷卻,定容至25ml,用(53WBUV/VIS)分光光度計(jì)于520測(cè)定OD值。
6.淀粉的提取
沉淀加水2ml,沸水浴糊化15min,冷卻后加9.2N高氯酸2ml,不時(shí)攪拌15min后加水2ml離心,上清液倒入50ml溶量瓶中,沉淀加2ml4.6N高氯酸,不時(shí)攪拌15min后加水3ml離心10min,上清液倒入50ml溶量瓶中,沉淀再加4ml水,離心10min,合并上清液并用蒸餾水定容。