馬鈴薯病毒檢測實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備工作及樣品的提取和稀釋
馬鈴薯病毒檢測實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備工作
實(shí)驗(yàn)前將抗體包被在微孔板上
根據(jù)抗體標(biāo)簽上標(biāo)識的稀釋倍數(shù),用1倍的包被緩沖液稀釋抗體?;旌暇鶆?/div>
請根據(jù)使用量來確定抗體稀釋液體積
注意:1個反應(yīng)孔需要100ul的抗體稀釋液。1ml的抗體稀釋液足夠8個反應(yīng)孔使用,10ml的抗體稀釋液夠96個反應(yīng)孔使用。
在聚乙烯材質(zhì)的容器中制備抗體溶液。(避免抗體黏附的容器上)??贵w溶液準(zhǔn)備好后需立即包被,否則抗體可能會部分失效。
抗體稀釋液不能存放,配制好后請立即使用。
包被抗體
在每個反應(yīng)孔中加入100ul抗體稀釋液
孵育
在恒濕箱中,室溫下(25℃)孵育4小時或在4℃條件下過夜
洗板
孵育結(jié)束后,將反應(yīng)孔中的試劑倒出
加入250ul的1倍PBST緩沖液,之后快速倒出,重復(fù)4-8次
將微孔板倒扣在吸水紙上以控干孔中殘留液體
馬鈴薯病毒檢測樣品的提取及稀釋
樣品的提取
盡可能選擇出現(xiàn)癥狀的植物組織作為樣品,通常將葉片作為ELISA實(shí)驗(yàn)的檢測樣品,其它植物組織也可用于ELISA實(shí)驗(yàn)
在1個反應(yīng)孔中加入多片葉片的提取液會使實(shí)驗(yàn)更經(jīng)濟(jì)一些,但卻降低了實(shí)驗(yàn)的靈敏度。如對樣品提取有任何疑義請與本公司聯(lián)系
若用研缽提取樣品,在每份樣品提取后請*清洗研缽,以免造成樣品間的相互污染
絕大多數(shù)樣品,可使用通用樣品提取緩沖液。但有些植物(葡萄、藍(lán)莓等)必須使用特殊的提取緩沖液。如對樣品提取緩沖液有任何疑義請與本公司聯(lián)系
樣品的稀釋
樣品研磨后,將樣品提取液與提取緩沖液以1:10(樣品提取液體積:提取緩沖液體積)的比例混合均勻?;蛞?:10(樣品質(zhì)量:提取緩沖液體積)的比例在提取緩沖液中研磨樣品
每個反應(yīng)孔需要100ul的樣品提取稀釋液。多準(zhǔn)備一些樣品提取稀釋液以利于吸取
以上便是今天關(guān)于馬鈴薯病毒檢測實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備工作及樣品的提取和稀釋的全部分享了,希望對大家今后使用本設(shè)備能有幫助。